ČESKÁ UROLOGIE / CZECH UROLOGY – 4 / 2017
290 Ces Urol 2017; 21(4): 289–298 ORIGINÁLNÍ PRÁCE tak u pacientů s patologickým spermiogramem (53,1 % vs. 35,2 %). Závěr: Vyšší zastoupení apoptotických sper- mií v ejakulátu snižuje jeho kvalitu. Test apoptózy spermií, fragmentace DNA a stanovení integrity akrozomu doplňují informace získané ze spermio- gramu a umožňují vytipovat rizikové subfertilní pacienty, pro které je vhodné podrobné androlo- gické vyšetření. KLÍČOVÁ SLOVA Apoptóza, integrita DNA, fertilita, muži, kvalita spermií. SUMMARY Kratka Z, Luxova S, Vik V. Flow cytometry analy- sis of sperm quality in sub-fertile men. Semen analysis does not provide enough in- formation about sperm quality. Flow cytometry tests allow us to analyse percentage of apoptotic sperm, DNA fragmentation and acrosome integrity. Sub-fertile patients are better diagnosed using these tests. Objective: Overview of sperm quality data measured by flow cytometry. Material and method: 800 sub-fertile men (aged 21–66 years) were treated at GENNET – assist- ed reproduction centres. 366 patients had normal results and 434 patients had pathological param- eters of semen analysis. Flow cytometry analyses of apoptotic spermwere done in all patients. DNA fragmentation rate was measured by TUNEL as- say in 65 samples. The acrosome integrity was measured in 213 samples. Two groups of patients were set according to the number of apoptotic sperm in the semen samples – ApoHigh group included samples with > 50 % of apoptotic sperm and ApoLow group included samples with < 50 % of apoptotic sperm. Results: 16.9 % of normal semen samples were ApoHigh as well as 53.9 % pathological se- men. Higher average values of DNA fragmenta- tion were detected in the ApoHigh group than in the ApoLow group both in normal semen (24.0 % vs. 13.5 %) and in pathologic semen too (33.3 % vs. 18.0 %). Higher average values of the acrosome integrity were detected in the ApoHigh group than in the ApoLow group both in normal semen (40.2 % vs. 23.9 %) and in the pathologic samples as well (53.1 % vs. 35.2 %). Conclusion: The presence of apoptotic sperm decreases the semen quality. The examination of apoptosis, DNA fragmentation and acrosome in- tegrity together with microscopic semen analyses provide a better diagnostic tool how to identify sub-fertile men, than simple semen analysis. These tests might be helpful for selection of patients for further uro-andrological examination and treat- ment. KEY WORDS Apoptosis, DNA integrity, fertility, men, sperm qual- ity. ……… ÚVOD Infertilita postihuje 15 % párů v plodném věku, přibližně 48,5 milionů párů na celém světě (1, 2). U poloviny infertilních párů je příčina infertility zjištěna u mužů (2). Standardním vyšetřením kvality ejakulátu je spermiogram (3). Nicméně prediktivní význam spermiogramu, jako me- tody potvrzující fertilitu muže, je sporný (4, 5). Spermiogram hodnotí zejména koncentraci, po- hyblivost a základní morfologii spermií (3). Ale fertilní spermie musí mít také kvalitní membránu s potřebnými receptory, nepoškozenou DNA, dostatek energie, musí obsahovat potřebné en- zymy v akrozomu atd. (5) Kvalitní DNA je nutná pro úspěšný vývoj em- brya vzniklého přirozeným oplozením nebo při oplození pomocí metod asistované reprodukce (5, 6). Stanovení integrity DNA ve spermiích se považuje za velmi nadějný biomarker fertility, ale samo o sobě není dostatečně přesné pro spolehlivou predikci úspěšnosti přirozeného či in vitro provedeného oplození (7). Proto se doporučuje využívat další diagnostické postupy (5, 7). Jaká vyšetření jsou v současnosti dostupná
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy NDA4Mjc=